دراسة كيموحيوية ونسيجية لانزيم أمينواسليز-1 المنقى من السائل الامنيوني في الجرذان المصابين بحالة الإجهاد التأكسدي المستحدثة بخلات الرصاص
الشريط الجانبي للمقالة
محتوى المقالة الرئيسي
الملخص
تضمن البحث فصل ودراسة إنزيم أمينواسيليز-1 (ACY1) من السائل الأمنيوني للحوامل الاصحاء، إذ تم فصل حزمة رئيسية واحدة فقط ذات فعالية عالية بتقنية التبادل الايوني السالب نوع DEAE-cellulose للراسب البروتيني الناتج عن ترسيب البروتينات باستخدام كبريتات الامونيوم (65%) بعد عملية الفرز الغشائي، اذ وصلت عدد مرات التنقية الى (19) مرة, وعند استخدام عمود الترشيح الهلامي باستخدام سيفادكس من نوع G-100 تم الحصول على نقاوة عالية للإنزيم وصلت عدد مرات التنقية له الى (38), وقد وجد ان الوزن الجزيئي لإنزيم المعزولة كان بحدود 46698 دالتون عند استخدام تقنية كروماتوغرافي الترشيح الهلامي. درس تأثير إنزيم ACY1المعزول على الجرذان المصابين بالإجهاد التأكسدي المستحدث بخلات الرصاص (LA) بجرعة 40 ملغم /كغم من وزن الجرذي وتمت مقارنتها مع الطبيعيين وذلك من خلال قياس المتغيرات الكيموحيوية المختارة والتي تضمنت: الكلوتاثايون (GSH) والمالوندايالديهايد(MDA) وإنزيم اسبارتيت أمينوترانسفريز (AST) وإنزيم ألانين أمينوترانسفريز(ALT) وكذلك من خلال الفحص النسيجي للكبد والكلية. اذ أظهرت النتائج ارتفاعاً معنوياً في مستويات (MDA وAST وِALT) وانخفاضها في مستوى (GSH) مقارنة مع مجموعة السيطرة السالبة، كما لوحظ ان هناك انخفاضاً معنوياً في مستويات (MDA وAST وِALT) وارتفاع في GSH عند حقن إنزيم ACY1 4 ملغم /كغم من وزن الجرذي مع LA بجرعة 40 ملغم /كغم. وأظهرت نتائج الفحص النسيجي وجود تغيرات مرضية عالية لأنسجة الكبد للجرذان المعاملة بمادة LA 40 ملغم /كغم من وزن الجرذان عند مقارنتها مع الطبيعيين، لقد حصل تحسن لأنسجة الكبد والكلية عند استخدام إنزيم ACY1 4 ملغم /كغم من وزن الجرذان مع LA، وهذه النتائج تثبت دور انزيم ACY1 في الحماية من الاجهاد التأكسدي والتقليل من حدة الأمراض المختلفة.
درس تأثير إنزيم ACY1المعزول على الجرذان المصابين بحالة الكرب التأكسدي المستحدث بواسطة خلات الرصاص بجرعة 40 ملغم /كغم من وزن الجسم ومقارنتها مع الجرذان الطبيعيين وذلك من خلال قياس المتغيرات الكيموحيوية المختارة والتي تضمنت: الكلوتاثايون (GSH) والمالوندايالديهايد(MDA) وإنزيم اسبارتيت أمينوترانسفريز (AST) وإنزيم ألانين أمينوترانسفريز(ALT) وكذلك من خلال الفحص النسيجي للكبد والكلية. اذ أظهرت النتائج ارتفاعاً معنوياً في مستويات (MDA وAST وِALT) وانخفاضها في مستوى (GSH) مقارنة مع مجموعة السيطرة، كما لوحظ ان هناك انخفاضاً معنوياً في مستويات (MDA وAST وِALT) وارتفاع مستوى GSH عند استخدام الإنزيم المعزول بجرع4 ملغم /كغم من وزن الجرذان مع خلات الرصاص بجرعة 40 ملغم /كغم. وأظهرت نتائج الفحص النسيجي وجود تغيرات مرضية عالية لأنسجة الكبد للجرذان المعاملة بخلات الرصاص بجرعة 40 ملغم /كغم من وزن الجرذان عند مقارنتها مع الجرذان الطبيعيين، وحصول حالة تحسن لأنسجة الكبد والكلية عند استخدام الإنزيم المعزول بجرع 4 ملغم /كغم من وزن الجرذان مع خلات الرصاص، وهذه النتائج تثبت دور الإنزيم المعزول في حماية الجسم من الكرب التأكسدي والتقليل من حدة الأمراض الناتجة عنه.
تفاصيل المقالة
هذا العمل مرخص بموجب Creative Commons Attribution 4.0 International License.
كيفية الاقتباس
المراجع
Cheng Q, Gu S, Liu Z, Wang C, Li X. Expressional divergence of the fatty acid-amino acid conjugate hydrolyzing aminoacylase 1 (LACY-1) in Helicoverpa armigera and Helicoverpa assulta. Sci. Rep. 2017; 7: 8721.
Sommer A, Christensen E, Schwenger S. The molecular basis of aminoacylase 1 deficiency. Biochim. Biophys. Acta. 2011;1812:685–690.
Nelson D L, Cox M M. Lehninger principles of biochemistry- 7th Ed. W.H. Freeman and Co Ltd. New York. USA. 2017; pp. 68-146.
Yu B, Yu N, Liu X, Cao X, Zhang C, Chang H. Study of the expression and function of ACY1 in patients with colorectal cancer. Oncol. Lett. 2017;13: 2459-2464.
Maceyka M, Nava VE, Misltien S, Spiegel S . Aminoacylase 1 is a sphingosine kinase-1 interacting protein. FEBS Lett. 2004;568:30-34.
Sass JO, Vaithilingam J, Gemperle-Britschgi C, Delnooz CC, Kluijtmans LA, van de Warrenburg BP, et al. Expanding the phenotype in aminoacylase 1 (ACY1) deficiency: characterization of the molecular defect in a 63-year-old woman with generalized dystonia. Metab. Brain. Dis. 2016; 31(3):587-92.
Alessandrì G, Casarano M, Pezzini I, Doccini S, Nesti C. Isolated mild intellectual disability expands the aminoacylase 1 phenotype spectrum. JIMD Rep. 2014;16:18-78.
Rodríguez-Rodríguez P, Ramiro-Cortijo D, Reyes-Hernández G. Implication of oxidative stress in fetal programming of cardiovascular disease. Front. Physiol. 2018; 9:602.
Lumaka A, Race V, Peeters H, Corveleyn A, Coban-Akdemir Z, Jhangiani SN, et al . A comprehensive clinical and genetic study in 127 patients with ID in Kinshasa, DR Congo. Am. J. Med. Genet. 2018;176(9):1897-1909
Al-Helaly L A. Studies on paraoxonase-1 isolated from amniotic fluid and its effect against cisplatin-induced hepatotoxicity and cardiotoxicity in rats. Raf. J. Sci. 2018; 27(2):42-56.
Schacterle GR, Pollack RL. A simplified method for the quantitative assay of small amounts of protein in biological material. Anal. Biochem. 1973; 51: 654-55.
Peterson GL. Determination of total protein . Met. Enzymol. 1983;91:95-119.
Burtis C A, Ashwood E R, Bruns DE. Tietz textbook of clinical chemistry and molecular diagnostics. By Saunders, an imprint of Elsevier Inc. USA. 2012:pp.356, 368.
Robyt JF, White BJ. Biochemical techniques, Theory and practice. Wadsworth, Inc., Belmont, California, USA. 1987; p.40, 88.197.
Al-Helaly L A. Isolation of prolidase from amniotic fluid and study of its kinetic and affinity properties towards pharmacological compounds. EDUSJ. 2019; 28(3): 52-72.
Rodwell V W, Bender D A, Botham K M, Kennelly P J, Weil P A. Harper's illustrated biochemistry. 31st ed. The McGraw-Hill Companies. 2018;pp.251, 265.
Rosen H. A modified ninhydrin colorimetric analysis for amino acids . Arch. Biochem. Biophys. 1957;67:10-15.
Fauziah PN, Maskoen AM, Yuliati T, Widiarsih E. Optimized steps in determination of malondialdehyde (MDA) standards to diagnostic of lipid peroxidation. Padjadjaran J. Dent. 2018;30(2):136-139.
Luna LG. Manual of histological staining methods of armed forces institute of pathology. 3rd.ed., McGraw-Hill Book Company ,New York, Toronto, London and Sydney. 1968;pp3-8,
Smith T, Said Ghandour M, Wood PL. Detection of N-acetyl methionine in human and murine brain and neuronal and glial derived cell lines. J. Neurochem. 2011;118(2):187-194.
Zhong Y, Onuki J, Yamasaki T. Genome-wide analysis identifies a tumor suppressor role for aminoacylase 1 in iron-induced rat renal cell carcinoma. J. Carcinog. 2009; 30:158–164.
GiardinaT, Perrier J, Puigserver A. The rat kidney acylase I, characterization and molecular cloning differences with other acylases I. Euro. J. Bio. Chem. Banner. 2001; 267 (20):6249-6255.
El Tantawy Y. Antioxidant effects of Spirulina supplement against lead acetate-induced hepatic injury in rats. J. Tra. Comp. Med. 2016;6(4): 327-331.
Scinicariello F, Murray HE, Moffett DB, Abadin HG, Sexton MJ. Lead and deltaaminolevulinic acid dehydratase polymorphism: where does it lead? A meta-analysis. Environ. Health. Perspect. 2007;115(1):35-41.
Ansar S, Farhat S, Albati A, Abudawood M, Hamed S. Effect of curcumin and curcumin nanoparticles against lead induced nephrotoxicity. Biomed. Res. 2019;30 (1): 57-60
Rubino F. Toxicity of glutathione-binding metals: A review of targets and mechanism. Toxics. 2015;3(1):20–62.
Zou H, Sun J, Wu B, Yuan Y, Gu J, Bian J, et al. Effects of cadmium and/or lead on autophagy and liver injury in rats. Biol. Trace Elem. Res. 2020; doi: 10.1007/s12011-020-02045-7. [Epub ahead of print]
Dacaj R, Izetbegovic S, Dreshaj S. Elevated liver enzymes in cases of preeclampsia and intrauterine growth restriction. Med. Arch. 2016;70(1): 44–47.
Moneim AE. Indigofera oblongifolia prevents lead acetate-induced hepatotoxicity, oxidative stress, fibrosis and apoptosis in rats. PLoS One. 2016;11(7): e0158965.
Shatha HK, Nazarmuteb ZA, Moayad MU. The effect of penicillamine in reducing the toxic effects of lead acetate on some blood parameters, liver functions and testicular tissue in male rats. Int. J. Pharm. Res. 2016;5: 22-40.
Lamidi IY, Akefe IO. Mitigate effects of antioxidants in lead toxicity. Res. Rep. Toxi. 2017;1 (1):3.